Maltose＋Orthophosphate ＝ D-Glucose＋β-D-Glucose 1-phosphate

比活性
タンパク質1mg当りの国際酵素単位　 ＞5units
混在活性
α-Glucosidase　＜0.05％
α-Amylase　＜0.05％

Ｉ．分光光度計による活性測定方法
波長：　340nm、光路長：　1cm
酵素反応温度：　30℃
グルコース定量温度：　25～30℃
操作手順
酵素反応
主反応
1.00mL　Phosphate buffer（0.1mol/L, pH 5.6）
1.00mL　Maltose（0.1mol/L）
0.05mL　Maltose phosphorylase（約6 IU/mL）
Blank反応
1.00mL　Citrate buffer（0.1mol/L, pH 5.6）
1.00mL　Maltose（0.1mol/L）
0.05mL　Maltose phosphorylase（約6 IU/mL）
酵素反応（正確に10分間、30℃）
煮沸（3分間）
ice bathにて冷却
グルコースの定量
2.80mL　MgCl₂（3mmol/L）を含むTriethanolamine-HCl-NaOH（0.3mol/L, pH 7.5）
0.10mL　ATP（10mg/mL）
0.10mL　NADP+（10mg/mL）
0.05mL　主反応終了溶液：AＩ
0,005mL　G6PDH（1,000 IU/mL）
0,005mL　HK（1,000 IU/mL） ：AＩＩ
ブランクとして主反応終了溶液のかわりにブランク反応終了溶液を使用し、上記と同様に操作する。：　BＩ, BＩＩ
ＩＩ．計算式

ΔA ＝ 340nmにおける吸光度変化量（AＩＩ-AＩ）-（BＩＩ-BＩ）
V1 ＝ グルコース定量液量（3.06mL）
V2 ＝ 酵素反応液量（2.05mL）
6.2 ＝ 340nmにおけるNADPHのミリモル
分子吸光係数（L･mmol^{- 1}･cm^?1）
d ＝ 光路長（1cm）
v1 ＝ 酵素反応液のサンプル液量（0.05mL）
v2 ＝ 酵素液量（0.05mL）
t ＝ 酵素反応時間（10分）
ΔA/min ＝ 340nmにおける1分間当りの吸光度変化量
V ＝ 最終液量（3.17mL）
D ＝ 酵素希釈率
6.3 ＝ 340nmにおけるNADHのミリモル分子吸光係数（L･mmol^-1･cm^-1）
d ＝ 光路長（1cm）
v ＝ 酵素液量（0.02mL）