Hydrolysis of terminal, non-reducing 1, 4-linked a-D-glucose residues with release of α-D-glucose α-D-Glucoside＋H₂O ＝ Alcohol＋α-D-Glucose

比活性
タンパク質1mg当りの国際酵素単位　 ＞50units
混在活性
α-Galactosidase　＜0.01％
β-Galactosidase　＜0.01％
β-Glucosidase　＜0.01％

Ｉ．分光光度計による活性測定方法
波長：　340nm, 光路長：　1cm, 温度：　25℃
グルコース定量温度：　20～25℃
操作手順
酵素反応
1.50mL　EDTA・2Na（1.35mmol/L）を含むAcetate buffer（0.1mol/L, pH 6.0）
0.50mL　Maltose（555mmol/L）
0.02mL　α-Glucosidase（約20 IU/mL）
正確に5分間反応する。
その後、3分間煮沸し、ice bathにて冷却する。
グルコースの定量
2.60mL　Triethanolamine-HCl-KOH（0.3mol/L, pH 7.6）
0.10mL　MgCl₂（0.1mol/L）
0.10mL　ATP（16mmol/L）
0.10mL　NADP+（11mmol/L）
0.10mL　酵素反応終了溶液：AＩ
0.005mL　G6PDH（1,000 IU/mL）
0.015mL　HK（1,000 IU/mL） ：　AＩＩ
ブランクとしてα-G1ucosidase溶液のかわりに蒸留水を0.02mL使用し、上記と同様に操作する：　BＩ、BＩＩ
ＩＩ．計算式
 

ΔA ＝ 340nmにおける吸光度変化量
（AＩＩ-AＩ）-（BＩＩ-BＩ）
V1 ＝ グルコース定量液量（3.02mL）
V2 ＝ 酵素液量（2.02mL）
6.2 ＝ 340nmにおけるNADPHのミリモル分子吸光係数（L･mmol^-1･cm^-1）
D ＝ 酵素希釈率
d ＝ 光路長（1cm）
v1 ＝ 酵素反応液のサンプル液量（0.10mL）
v2 ＝ 酵素液量（0.02mL）
t ＝ 酵素反応時間（5min）